ПЛР на хламідії - методика проведення аналізу

ПЛР на хламідії - методика проведення аналізу

Сучасна медицина продовжує розвиватися в напрямку розробки не тільки нових методів лікування, а й діагностики захворювань. Бездоганно точні способи «впізнання» багатьох з них були відкриті дуже давно.

Але більшість потребує доопрацювання та удосконалення через велику кількість діагностичних помилок, обмежень щодо стадій, на яких вони стають впізнаваними для лікаря та обладнання, тощо. Тим більше це стосується патологій, відкритих або виділених у самостійне захворювання зовсім недавно.


Недоліки сучасних діагностичних систем позначаються на них особливо яскраво, ускладнюючи не тільки вивчення і збір статистики там, де зібрати нові дані потрібно в першу чергу, але і створення ліків проти них.

Особливості захворювання

Хламідіоз є якраз однією з інфекційних патологій, відкритих порівняно недавно - менше 30 років тому. Мова йде про зараження організму людини найпростішими - хламідіями.

По ідеї, він мав би протікати за типом трихомонозу, так як його збудник трихомонаду багато в чому схожа з хламідією, але не тут-то було.

Виявилося, що хламідії - паразити куди більш потайні, ніж трихомонади, але не менш небезпечні, особливо для репродуктивної функції організму.

І якраз їх здатність віртуозно ховатися (в прямому сенсі слова, оскільки вони розмножуються виключно всередині клітин, за їх мембраною) від усіх класичних методів діагностики колись сильно змістила терміни відкриття цієї патології. У цьому сенсі нові методи діагностики на зразок ПЛР стали справжнім порятунком для науки, оскільки без них діагностика цілої низки захворювань або зовсім неможлива, або видає помилкові результати куди частіше, ніж хотілося б.

Інформативність ПЛР

ПЛР або, точніше кажучи, полімеразна ланцюгова реакція - це лабораторний метод діагностики, що дозволяє виявити в біологічних зразках, узятих у пацієнта, фрагменти сторонньої ДНК, що належить якому-небудь збуднику. Зазвичай їх у взятому зразку не так вже й багато, з чим і пов'язана проблема стандартної діагностики.


Недостатня чутливість приладів дозволяє побачити тільки цілі, здорові мікроорганізми або антитіла до них, та й то якщо їх не упустить з виду обладнання або лаборант. Ну, а вже якщо жоден екземпляр збудника не потрапив у зразок, або антитіла до нього зовсім не виробляються імунітетом, результати аналізу виходять неправдивими.

А ось ПЛР - це аналіз за досить точною методикою, оскільки вона дозволяє виділити зі зразків найдрібніші сліди сторонніх організмів у вигляді фрагментів їх ДНК, яка, зрозуміло, не схожа з ДНК власних клітин тіла. Але оскільки тільки за цими

«шматочкам» визначити тип збудника неможливо, наступним етапом ПЛР стає прискорене розмноження знайденого матеріалу. І тільки коли його обсяг збільшується в кілька тисяч разів, лікар вже може сказати, якому хвороботворному організму він належить.

Що стосується хламідіозу, то це захворювання, що передається, до речі, далеко не тільки статевим шляхом (його можна підхопити і в зараженій ними водоймі), без точних методів діагностики могли б взагалі не виявити. Будь ця інфекція більш очевидною з точки зору симптомів або хоча б імунної реакції на неї, вона могла б стати відомою ще до середини ХХ століття.

Але чи не єдина вірна її ознака - стійке, незрозуміле іншими факторами безпліддя. Тобто ознака дуже сумнівна, тому що безпліддя може наступати по сотні різних причин. Що до антитіл, то імунний захист таких не виробляє просто тому, що не помічає хламідії.

Ці найпростіші рідко виявляють себе, потрапляючи в міжклітинний простір, тому що розмножуються виключно всередині клітин. Хламідії і трихомонади не здатні самостійно витягувати енергію з їжі, і для цього їм потрібні «енергетичні станції» клітин - мітохондрії. А всередину клітин лейкоцитам доступу немає - туди здатні проникати виключно лімфоцити (імунні тіла лімфи). Тому у зараження ними практично відсутні типові симптоми інфекції - воно не дає ні вираженого свербіння, ні запалення, ні підвищення температури тощо.

Зате хламідії рано чи пізно заражають яєчники у жінок і насінники у чоловіків, приводячи в повну, так би мовити, непридатність сперматозоїди, яйцеклітини і плаценту. А якщо навіть жінці випадково (в даному випадку це дійсно випадковість) пощастить завагітніти, навряд чи їй вдасться виносити плід весь належний термін. Більш ніж у 80% випадків ця інфекція призводить до викидів задовго до терміну навіть у 7 міс., починаючи з якого лікарі можуть ще спробувати «дорости» малюка в штучних умовах.


З усіх цих причин хламідіоз, ледь він увійшов до офіційного списку захворювань, вже поспішили обізвати «комерційним» діагнозом. Тобто патологією, настільки важко визначною, що медицина нерідко користується нею для призначення лікування (звичайно, не безкоштовного) навіть здоровим, нічим не інфікованим людям. А насправді, хоч варіант з помилковим призначенням і не варто виключати повністю, до недавніх пір це часто траплялося зовсім не з вини нечистого на руку лікаря, а через діагностичні помилки.

Як правильно здаватимуть

ь аналіз ПЛР?

Отже, ПЛР як метод діагностики цінний тим, що він дозволяє точно встановити:

  • присутність в організмі збудників ще до появи перших симптомів захворювання;
  • наявність або відсутність інфекцій прихованих - не викликають реакції імунітету (вироблення спеціальних антитіл) або не дають властивих тільки їм симптомів;
  • тип збудника, навіть якщо при взятті зразка для аналізу не вдалося отримати жодного повного екземпляра його ДНК.

Але підвищена точність діагностики ПЛР є одночасно і її гідністю, і недоліком. Наприклад, зрозуміло, що якщо до відібраного для ПЛР зразка потрапить щось стороннє просто з навколишнього середовища (а бактерій у ньому завжди вистачає), результат теж виявиться ложноположним.

Аналогічно, ПЛР не відрізняє минулі інфекції від поточних. Тобто, якщо ми недавно перехворіли чимось, і у взятому у нас зразку виявляться сліди вже зруйнованих імунітетом або антибіотиками телець збудника, ми, знову-таки, отримаємо помилкове «спрацювання».

Тому ПЛР - це не аналіз кала, який найзручніше і найлогічніше брати вдома, оскільки вимоги до нього пред'являються номінальні. Ми можемо взяти зразок забрудненим інструментом або помістити його в далеку від стерильності ємність. Плюс, потрібно враховувати, що його можна елементарно взяти не там, де потрібно, і отримати відповідь, що ми повністю здорові, хоча насправді це далеко не так.


Так що зразки для ПЛР має право взяти тільки лікар, в умовах ідеальної стерильності.

Особливої підготовки він не вимагає, а здати аналіз має сенс у таких випадках:

  • У процесі планування вагітності у жінок - щоб згодом обійшлося без ускладнень і навіть викидня;
  • Вже після настання вагітності у жінки - щоб лікар міг своєчасно поставити майбутню маму та її дитину на особливий контроль у зв'язку з виявленням у неї хламідіозу і тим фактом, що при ньому вагітність не буває безпроблемною майже ніколи;
  • Якщо мазок зі шкіри статевих органів містить домішки, характерні для сепсису, але не містить його конкретних збудників;
  • Якщо мазок містить багато збудників різних типів, включаючи умовно-патогенну мікрофлору. Для цієї патології типове ослаблення місцевого імунітету статевих шляхів, тому надто «брудний» мазок напевно зацікавить гінеколога.

Зазвичай аналіз ПЛР у жінок проводять саме шляхом взяття мазка з вологолища.

Але розраховувати виявити там безпосередньо самих найпростіших ніхто всерйоз не розраховує, оскільки вони можуть жити тільки в клітинах тіла.

А виділення містять максимум залишкові сліди їх присутності - «осколки» ДНК загиблих з якихось причин хламідій. Оскільки заразитися хламідіозом можна не тільки статевим шляхом, ПЛР показаний до проведення в тому числі і у дітей. Наприклад, аналіз ПЛР у дітей беруть, якщо їхнім батькам був поставлений такий діагноз, дитина народилася в інфікованої матері або є підозра, що вона просто підхопила його в громадському басейні, душовій та ін.


При цьому методологія його проведення у дітей будь-якого віку нічим не відрізняється від такої у дорослих. Так що, додаткові клопоти тут будуть пов'язані тільки з лікуванням хламідіозу в разі, якщо результат виявиться позитивним.

Image

Publish modules to the "offcanvas" position.